Disa enzima të përdorura zakonisht në eksperimentet PCR

Reaksioni zinxhir i polimerazës, i shkurtuar siPCRnë anglisht, është një teknikë e biologjisë molekulare që përdoret për të amplifikuar fragmente specifike të ADN-së.Mund të konsiderohet si një replikim i veçantë i ADN-së jashtë trupit, i cili mund të rrisë shumë një sasi shumë të vogël të ADN-së.Gjatë gjithëPCRprocesi i reagimit, një klasë e substancave luan një rol jetësor - enzimat.

1. Taq ADN

Në eksperimentet në ditët e para tëPCR, shkencëtarët përdorën polimerazën I të ADN-së Escherichia coli, Por ka një problem me këtë enzimë: ajo duhet të plotësojë enzimën e re sa herë që kryhet një cikël, gjë që i bën hapat e operacionit paksa të komplikuara dhe është e vështirë të amplifikohen plotësisht automatikisht.Ky problem u zgjidh pasi shkencëtarët izoluan aksidentalisht polimerazën e ADN-së Taq nga Thermus aquaticus në vitin 1988. Që atëherë, amplifikimi automatik i ADN-së është bërë realitet.Zbulimi i kësaj enzime bën gjithashtuPCRteknologjia është një teknologji e përshtatshme, praktike dhe universale.Aktualisht, Taq ADN polimeraza është polimeraza më e zakonshme në kompletet e ADN-së.

2. PfuDNA

Siç u përmend më lart, Taq DNase ka një defekt të madh, kështu që shkencëtarët kanë modifikuar Taq ADN polimerazën në një masë të caktuar për të shmangur amplifikimin jospecifik për shkak të mospërputhjes, duke rezultuar në rezultate të pasakta të testit.Por modifikimi i Taq ADN polimerazës mund të pengojë aktivitetin e ADN polimerazës në temperaturën e dhomës.PfuDNA polimeraza mund të plotësojë fare mirë disavantazhet e mësipërme të Taq ADN polimerazës, në mënyrë që reagimi PCR të mund të kryhet normalisht dhe shkalla e suksesit të amplifikimit të gjenit të synuar mund të përmirësohet në mënyrë efektive.

3. Transkriptaza e kundërt

Transkriptaza e kundërt u zbulua në vitin 1970. Kjo enzimë përdor ARN-në si shabllon, dNTP si substrat, ndjek parimin e çiftimit të bazave dhe sintetizon një varg të vetëm të ADN-së plotësuese me shabllonin e ARN-së në drejtimin 5'-3'.Transkriptaza e kundërt varet kryesisht nga aktiviteti i polimerazës së ADN-së nga shabllonet e ADN-së ose ARN-së dhe për këtë arsye nuk ka aktivitet ekzonukleazë 3'-5'.Megjithatë, ajo ka aktivitet RNase H, e cila kufizon gjatësinë e sintezës së transkriptazës së kundërt në një masë të caktuar.Për shkak të besnikërisë së ulët dhe qëndrueshmërisë termike të transkriptazës së egër të kundërt, shkencëtarët gjithashtu e modifikuan atë.

PërPCREksperimentet, materialet kryesore të konsumit janë: tub PCR individual, tub PCR me 4/8 shirita, pllaka PCR.

Labio'sMaterialet konsumuese PCRkanë sa vijonPërparësitë:

Pllakat PCR: Përputhshmëri e gjerë e cikluesit termik;Me kontrast të lartë, identifikim i lehtë i pusit;reflektim fluoreshence i pusit;mirëtransferim i nxehtësisë;Inhibitorë të certifikuar të DNase, RNase, ADN-së, PCR dhe të testuar pa pirogjen.

Tuba PCR individuale: Rezistent ndaj avullimit; i mirëtransferim i nxehtësisë;qartësi optike e shkëlqyer; DNase e certifikuar, RNase, ADN, frenues PCR dhe të testuar pa pirogjen.

Tuba PCR me 4/8 shirita: Mure ultra të hollë; qartësi e lartë; reflektim i mirë fluoreshence;mund të përdoret në industrinë farmaceutike, industrinë ushqimore dhe biologjinë molekulare; material PP me cilësi të lartë, të virgjër; DNase të certifikuar, RNase, ADN, frenues PCR dhe të testuar pa pirogjen.